附睾上皮有分泌功能，其分泌物包括甘油磷酸胆碱、糖蛋白，固醇与唾液酸等。主细胞由于富含内质网，高尔基体发达并有小泡因而被认为有分泌功能。Killiam与Champman从大鼠附睾头部分离出主细胞、基细胞与成纤维细胞，用生物化学方法测定GPC，唾液酸与蛋白质的含量，发现主细胞内的含量要比基细胞与成纤维细胞大得多。
1．GPC
大鼠、兔、猴与人的附睾能分泌GPC，但合成的机制尚未弄清。虽然附睾头部与尾部(大鼠、兔、羊)均能合成GPC，但似乎头部更为活跃，人却以体部所含GPC最高．一般动物自附睾头部至尾部，GPC的浓度增加，说明精于在雄性生殖道内不能对GPC进行代谢。甘油磷酸胆碱二酯酶可使甘油从GPC分离出来。此酶存在于某些动物的子宫内，这样甘油可作为底物被雌性生殖道内的精于所氧化，但兔的子宫内没有GPC的裂解酶，在人与猴的子宫内亦未能证实。
2．唾液酸
人、大鼠、地鼠、兔、狗、羊、猴的附睾分泌唾液酸(游离的或与蛋白质结合)。曾对大鼠、地鼠、猴进行研究，在附睾头部，与精子结合的唾液酸的浓度是高的，但愈往下则其浓度愈低，至尾部则甚低，但附睾液内的唾液酸则以尾部为最高。唾液蛋白似与精于受精能力的发育与维持有关。
3．酸性糖蛋白
Leo等曾从大鼠附睾的胞质匀浆中分离出一种酸性糖蛋白，它含有中等量的炭水化合物，特别是甘露糖。
用免疫组织化学方法发现在附睾头近段没有AEG，到了头部中段，在主细胞与管腔精子内出现阳性。在头部远段染色比较一致。在尾部AEG出现在没有微绒毛的细胞内(很可能是亮细胞)。在尾部，AEG非常浓厚地被覆在主细胞的微绒毛上而不进入细胞。从附皋头远端开始，精子被AEG所包裹，以后在整个附睾腔内，精于都被AEG包裹。可以认为AEG是由附睾头远端主细胞所分泌，整个体部亦有此功能，到了附睾尾，没有包裹在精于上的AEG被亮细胞所吞饮。
最近有报道，大鼠精子在附睾的一定区域获得运动能力，这个区域恰好是AEG开始分泌并结合到精子上。AEG带很高的负电荷，而精于的成熟也认为与负电荷的增加有关。所以AEG很可能与精子的运动与成熟有密切关系。
4．雄激素
附睾上皮能否合成雄激素尚未能肯定，有报道大鼠、小鼠、羊、兔的附睾上皮可以从合适的底物合成雄激素而将之送入管腔内。也有报道在大鼠附睾上皮内有与雄激素合成有关的酶如3β羟固醇脱氧酶，并以体部活性最高，头部较弱，尾部则呈阴性。
